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Microlute PLR 血漿和血清中磷脂的去除方案

更新時(shí)間:2025-09-04瀏覽:70次

Microlute TM  PLR 血漿和血清中磷脂的去除方案 (實(shí)驗(yàn)方案)

 

使用 Microlute™ PLR 96 孔板或小柱,高效且可重復(fù)地去除血漿和血清樣品中的磷脂。


1.  加樣(Load)                  

向每個(gè)孔中加入 50–200 μL 的血漿或血清樣品。


2.  蛋白質(zhì)沉淀                      

向孔中加入 樣品體積 3–4 倍的沉淀溶劑,以沉淀蛋白質(zhì)。 

        

★  推薦溶劑:1% 甲酸 / 乙腈

★  可替代溶劑:1% 甲酸 / 甲醇


3.  混合(Mix)                    

在洗脫前,將兩種溶液充分混合以確保蛋白質(zhì)沉淀。


★ 選項(xiàng) 1 – 吸液混勻(推薦):
使用手動(dòng)移液器、自動(dòng)移液器或自動(dòng)加液系統(tǒng)上下吸打 3–4 次。

★ 選項(xiàng) 2 – 渦旋混勻:

建議使用高速混合,以獲得最佳均勻蛋白沉淀,同時(shí)避免飛濺或孔間交叉污染。

4.  洗脫(Elute)               

與傳統(tǒng)的填充型產(chǎn)品不同,Microlute™ PLR 無(wú)需高真空或高壓力即可高效、均勻地洗脫樣品。

★ 真空洗脫:
施加低于-0.1 bar 的真空,持續(xù) 3 分鐘,或直至樣品洗脫。

★ 正壓洗脫:
施加低于3 PSI 的壓力,持續(xù) 3 分鐘,或直至樣品洗脫。

★ 注意:如果磷脂去除或純化效果不夠理想,可降低真空或壓力,以減緩流速。

★ 警告:使用較高的真空或壓力可能導(dǎo)致磷脂去除效率下降,并增加其他基質(zhì)組分(如蛋白質(zhì))穿透到樣品中的風(fēng)險(xiǎn)。


5. 分析(Analyse)

★ 可直接將洗脫液進(jìn)樣至液相色譜系統(tǒng) LC;

★ 或者在進(jìn)樣前進(jìn)行稀釋;

★ 或者將洗脫液蒸干,再重溶于更適合分析的溶劑后進(jìn)樣。